磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理，进一步认识生命活动的本质。近年来随着蛋白质组技术的不断发展，蛋白质磷酸化的研究越来越受到广泛的关注。很多天然毒素和病原体也是通过改变胞内蛋白的磷酸化状态来发挥它们的影响。



磷酸化多肽主要指肽链中的Ser、Tyr和Thr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。目前为止，多肽的磷酸化修饰主要有后磷酸化法和单体法两种合成方法：
单体法修饰时，磷酸化的氨基酸由于侧链修饰的较大基团产生的位阻而导致难以与肽链缩合，并且之后的氨基酸引入都会比较困难，尤其在含有多个磷酸化位点修饰时，合成将变得异常困难，并且最终产物成分复杂，难以分离，产率极低。因此，当肽链中多个位点进行磷酸化时，可以考虑采用后磷酸化法，其合成过程主要就是在多肽合成结束之后，选择性的脱去要标记氨基酸的侧链保护基，对于Tyr，Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应。侧链保护基在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化时，可以采用双苄基亚磷酰胺，四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体，连接到羟基上，然后在过氧酸条件下氧化生成磷酰基，完成反应。



· 我们提供pSer、pTyr、pThr和D-pSer、D-pTyr、D-pThr的磷酸化修饰服务。
· 可同时进行2个位点、3个位点、4个位点、5个位点的磷酸化修饰。


磷酸化多肽合成案例（Thr(HPO3)、Tyr(HPO3)、Ser(HPO3) 等）
1. 序列中有4个磷酸化位点（xxxpSpTxxxpSxxxpTx），纯度为95%，完成周期为3周。
HPLC分析：


MS图谱：